2022-811
對于細胞培養(yǎng)而言,胎牛血清的重要性不言而喻。胎牛血清既是讓細胞快樂成長的需要營養(yǎng)物,又是可能導致細胞死亡的“原因”。辛苦養(yǎng)起來的細胞可能因為胎牛血清用錯而一切歸零……那么胎牛血清作為細胞培養(yǎng)最關鍵的原料之一,胎牛血清的質量直接決定培養(yǎng)細胞的成敗,千舍生物為各科研人員推薦以下幾款血清:一、干細胞專用胎牛血清(低內毒素FBS500-WE-002(ES))千舍生物嚴格控制胎牛血清的來源,做好檢驗檢疫與溯源等工作,心臟穿刺采血低溫分離,3次0.1μm無菌過濾,內毒素≤3EU/ml,可...
查看更多
2022-83
原理:當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞的數(shù)目即可換算出每mL細胞懸液中的細胞數(shù)量。操作步驟:1.將計數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈,并將蓋玻片蓋在計數(shù)板上;2.輕輕吹打細胞懸液,使細胞均勻分布;吸出少許細胞懸液滴在細胞入口,使細胞懸液充滿蓋玻片和計數(shù)板之間,靜置1-2min,使細胞沉降;注意蓋玻片下不要有氣泡,也避免細胞懸液進入旁邊的槽中;3.在顯微鏡下對A/B/C/D四個大格內的細胞進行計數(shù),壓在大格四周邊線上的細胞只計數(shù)壓在2條邊線上的細胞(如右側和下方...
查看更多
2022-83
一、貼壁細胞傳代(以一個T25瓶為例)1、吸出原培養(yǎng)液;2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;3、加入1ml左右胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞,放入培養(yǎng)箱消化;4、消化時間跟據(jù)細胞特性有所不同,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯分離變圓,側立培養(yǎng)瓶細胞可以滑落時可終止消化,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫落并在液體里反復吹打使細胞,使之盡量呈單顆細胞的懸浮液,這時可以在顯微鏡看下;6、收集細胞懸液離心,1...
查看更多
2022-83
1.實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風機運轉5-10min再開始實驗操作。2.實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內;實驗用品用完應移出超凈臺,以利于空氣的流通;實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。3.每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。4.操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容...
查看更多
2022-83
有下列情況者,對血清內毒素應格外留意篩選:1.養(yǎng)干細胞時,干細胞對內毒素非常敏感,如果血清中內毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。2.養(yǎng)免疫細胞時,過高的內毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。3.基因敲除相關的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結果“失之毫厘,謬以千里”。在準備血清和其他試劑時,選擇極低的內毒...
查看更多
2022-83
胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使...
查看更多
2022-82
2022-82
細胞培養(yǎng)過程中容易出現(xiàn)這樣或那樣的問題,這些問題都是在細胞生長方面來說,比如細胞的不貼壁、生長緩慢、生長不好,甚至死亡的原因,這些問題使得細胞研究者很是頭疼,下面是針對這些問題的原因和解決方法:一、培養(yǎng)細胞不貼壁可能原因:1.胰蛋白酶消化過度;2.支原體污染;3.培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解);4.細胞老化;5.接種細胞起始濃度太低或太高。解決方法:1.縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度;2.分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物;3...
查看更多Copyright © 2025 蘇州千舍生物科技有限公司版權所有 備案號:蘇ICP備20017200號-1
技術支持:化工儀器網(wǎng) 管理登錄 sitemap.xml