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2022-323
胎牛血清應(yīng)用廣泛，符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)是關(guān)鍵以國內(nèi)滅活病毒疫苗的制造過程為例，主要是通過體外大規(guī)模培養(yǎng)特定的細(xì)胞株來繁殖病毒。目前，主流培養(yǎng)液仍然采用基礎(chǔ)培養(yǎng)基加血清的方式，強(qiáng)調(diào)了對(duì)有效培養(yǎng)方法和一致材料的迫切需求。正規(guī)來源的胎牛血清不會(huì)額外添加其他不明成分，除了含有細(xì)胞所需的營養(yǎng)成分及輔助因子之外，還含有轉(zhuǎn)移和結(jié)合蛋白，有緩沖pH和解毒的作用，因而常用于疫苗生產(chǎn)細(xì)胞的培養(yǎng)。對(duì)于牛血清的應(yīng)用場(chǎng)景，目前國內(nèi)遵循的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是2020版《中華人民共和國藥典》三部通則（3604新生牛血清檢測(cè)...
查看更多2022-322
—胎牛血清有必要熱滅活嗎—01目的血清的滅活就是將血清置于56℃作用30min，然后將它們分裝儲(chǔ)存于-20℃。熱滅活的目的是為了去除血清中的補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì)，以排除對(duì)免疫分析的影響。胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒有必要。研究人員曾對(duì)商業(yè)胎牛血清中的補(bǔ)體成分進(jìn)行測(cè)定，他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1、C6僅達(dá)成年動(dòng)物血清的1-3%，而其它補(bǔ)體成分僅有成年動(dòng)物的5-50%，至于補(bǔ)體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過補(bǔ)體固定實(shí)驗(yàn)，我們也在多個(gè)不同批次的胎牛血清中獲得了相...
查看更多2022-321
血清的供應(yīng)量改變帶來的價(jià)格波動(dòng)由于中國海關(guān)總署對(duì)供應(yīng)企業(yè)和允許進(jìn)口的血源地做出了明確規(guī)定，胎牛血清的價(jià)格便與這些血源產(chǎn)地的供應(yīng)量息息相關(guān)。胎牛血清是一種天然產(chǎn)物，產(chǎn)地牛源的健康狀況和生長環(huán)境尤為重要，當(dāng)牛源產(chǎn)地氣候變化時(shí)，會(huì)極大的影響胎牛血清的產(chǎn)量。例如2018年澳洲地區(qū)發(fā)生干旱，導(dǎo)致農(nóng)場(chǎng)主不得不屠宰超量的牛以避免損失，這種情況間接導(dǎo)致當(dāng)年澳洲血源的胎牛血清供應(yīng)鏈同比往年有一個(gè)顯著的增長。所以說，跟一般的商品不同，胎牛血清的供應(yīng)量并非僅由胎牛血清的市場(chǎng)需求決定，而是由當(dāng)年的氣...
查看更多2022-318
一般在拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么?收到細(xì)胞后先不要開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議對(duì)收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況一般可以再申請(qǐng)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培...
查看更多2022-317
血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理？血清在解凍過程（包括沒有*解凍）或儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如凝集素、纖維蛋白原和玻連蛋白等）可能會(huì)聚集成團(tuán)，形成絮狀沉淀或外觀混濁；在運(yùn)輸過程中，由于時(shí)間較長，所以往往有少許解凍，因此也可能稍有沉淀，但這些都不影響血清性能。若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。
查看更多2022-311
耐藥細(xì)胞構(gòu)建方法目前已知的體外建立耐藥細(xì)胞株的方法主要有以下幾種：大劑量藥物沖擊法、藥物濃度遞增法、藥物濃度遞增與大劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因結(jié)合藥物篩選法。其中藥物濃度遞增法和大劑量藥物沖擊法成為臨床建立腫瘤細(xì)胞化療耐藥模型的常用方法。①藥物濃度遞增法是指最初使用低濃度的藥物刺激細(xì)胞，等待細(xì)胞適應(yīng)低濃度的環(huán)境之后，再略微提高藥物濃度，繼續(xù)等待細(xì)胞適應(yīng)目前的環(huán)境，經(jīng)過反復(fù)的培養(yǎng)和加壓，最終使細(xì)胞可以在高濃度的藥物環(huán)境下生存。②大劑量藥物沖擊法是在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入超高藥物濃度的...
查看更多2022-310
如何構(gòu)建耐藥細(xì)胞株？腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥性是腫瘤治療失敗的重要因素之一，成為目前阻礙腫瘤治療的絆腳石。因此，探索腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥的原因以及如何改善腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物耐藥仍是目前研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。腫瘤細(xì)胞耐藥的產(chǎn)生是一個(gè)復(fù)雜的過程，它的機(jī)制廣泛牽涉到藥物代謝學(xué)、病理學(xué)、生理學(xué)等多個(gè)學(xué)科，這就決定了腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥的機(jī)制是復(fù)雜的，因此體外建立化療藥物耐藥細(xì)胞株仍然是研究腫瘤細(xì)胞耐藥機(jī)制的重要方法。一種藥物長期作用于某類細(xì)胞，殺死其中沒有抗性的細(xì)胞，而對(duì)這類細(xì)胞中具...
查看更多2022-39
ELISA試劑盒又稱為酶聯(lián)免疫試劑盒，用于對(duì)液體樣本中的目標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量檢測(cè)。隨著國家對(duì)科研項(xiàng)目的重視，在科研單位和廣大科研類院校也越來越受歡迎。ELISA試劑盒之所以受歡迎和它自身的優(yōu)點(diǎn)是分不開的。首先適合檢測(cè)的樣本很廣泛包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本，具體根據(jù)試劑盒說明書決定，通常檢測(cè)靈敏度比較高。其次ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應(yīng)結(jié)合起來的一種微量分析技術(shù)。酶標(biāo)記抗原或抗體以后，既不影響抗原抗體反應(yīng)的...
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